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牛腺病毒3型(BAV-3)試劑盒(熒光-PCR法)

簡(jiǎn)要描述:熒光產(chǎn)品特點(diǎn):1、靈敏度高,抗污染能力強,定量準確,重復性好;2、樣本處理與PCR擴增在同一個(gè)PCR反應管中即可完成;3、無(wú)需加熱
產(chǎn)品說(shuō)明:1.高便捷性。 2.靈敏度高。 3.特異性強。 4.精密性好。 5.結果準確可靠。 6.嚴格的質(zhì)量標準。
結構及組成:聚合酶鏈式反應液(PCR反應液)、RNA
本試劑盒適用于動(dòng)物組織以及食品、飼料等樣本中綿羊CYTB基因的檢測

  • 產(chǎn)  地:上海
  • 廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
  • 更新時(shí)間:2021-09-27
  • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:2992

詳細介紹

品牌其他品牌貨號HXG549
規格50T供貨周期現貨
主要用途科研使用應用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)

         牛腺病毒3型(BAV-3)試劑盒(熒光-PCR法)

【產(chǎn)品名稱(chēng)】

通用名稱(chēng):牛腺病毒 3 型(BAV-3)核酸檢測試劑盒(熒光 PCR 法)

NameBovine Adenovirus Detection KitReal-Time PCR Method

【包裝規格】50T/

【預期用途】

牛腺病毒 3 BAV-3)是引起牛呼吸道疾病的主要病原體之一,特別是新生犢牛。臨床癥狀包括發(fā)燒,呼吸困難,鼻腔和眼結膜有分泌物等。病理變化主要出現在肺部,具有鮮明的肺小葉、肺氣腫和突變。血清學(xué)調查表明該病廣泛分布于世界各地,給養牛業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失。

本試劑盒適用于檢測肺組織、呼吸道及眼鼻分泌物等樣本中的牛腺病毒 3 型,用于牛腺病毒 3 型感染的輔助診斷。

【檢驗原理】

本試劑盒采用 TaqMan 探針?lè )▽?shí)時(shí)熒光 PCR 技術(shù),設計一對牛腺病毒 3 型基因保守區特異性引物,結合一條特異性探針,用熒光 PCR 技術(shù)對牛腺病毒 3 型基因保守區的 DNA 進(jìn)行體外擴增檢測,用于臨床上對可疑感染者的病原學(xué)診斷。

【試劑組成】

包裝規格

             50T/

BAV-3 反應液

500μL×2

酶液

50μL×1

BAV-3 陽(yáng)性質(zhì)控品

50μL ×1

陰性質(zhì)控品

250μL ×1

說(shuō)明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

【儲存條件及有效期】

-20±5℃,避光保存、運輸、反復凍融次數不超過(guò) 5 次,有效期 12 個(gè)月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

【標本采集】

捕殺牛:取肺部病變組織,5g;活牛:用滅菌棉拭子沾取牛氣管或眼鼻分泌物,然后置于裝有 0.5mL 生理鹽水的離心管中。

【保存和運輸】

上述標本短期內可保存于-20℃,長(cháng)期保存可置-70℃,但不能超過(guò) 6 個(gè)月,標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸, 嚴禁反復凍融。

1. 樣品處理(樣本處理區)

取動(dòng)物組織及其制品、食品或飼料約 1g,手術(shù)剪剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續研磨,待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中, 8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL 1.5mL 滅菌離心管中。核酸提取

1.3 核酸提取采用核酸提取或純化試劑磁珠法或離心柱法,請嚴格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

2. 試劑配制(試劑準備區)


根據待檢測樣本總數,設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽(yáng)性對照;樣品每滿(mǎn) 10份,多配制 1 份),每測試反應體系配制如下表:

步驟

循環(huán)數

溫度

時(shí)間

收集熒光信號

1

1 cycle

95℃

10min

2

40 cycles

94℃

15sec

55℃

30sec

1. 結果分析判定

1.1 結果分析條件設定

設置 Baseline Threshold:一般直接按機器自動(dòng)分析的結果分析,當曲線(xiàn)出現整體傾斜時(shí),根據分析后圖像調節 Baseline start (一般可在 3~15 范圍內調節)、stop (一般可在 5~20 范圍內調節),以及 Threshold Value (上下拖動(dòng)閾值線(xiàn)至高于陰性對照),重新分析結果。

1.2 結果判斷

陽(yáng)性:檢測通道 Ct ≤35,且曲線(xiàn)有明顯的指數增長(cháng)曲線(xiàn);

可疑:檢測通道 35<Ct ≤38,建議重復檢測,如果檢測通道仍為 35<Ct ≤38,且曲線(xiàn)有明顯的增長(cháng)曲線(xiàn), 判定為陽(yáng)性,否則為陰性;

陰性:樣本檢測結果 Ct >38 或無(wú) Ct 值。

2. 質(zhì)控標準

陰性質(zhì)控品:Ct>38 或無(wú) Ct 值顯示;

陽(yáng)性質(zhì)控品:擴增曲線(xiàn)有明顯指數生長(cháng)期,且 Ct ≤32; 以上條件應同時(shí)滿(mǎn)足,否則實(shí)驗視為無(wú)效。


牛腺病毒3型(BAV-3)試劑盒(熒光-PCR法)【注意事項】

? 所有操作嚴格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行;檢驗過(guò)程中,參照《GB/T 27403 實(shí)驗室質(zhì)量控制規范 食品分子生物學(xué)檢測》的規定進(jìn)行。

? 試劑盒內各種組分使用前應自然融化,混勻并短暫離心;

? 反應液應避光保存;

? 反應中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

? 使用一次性吸頭、一次性手套和各區工作服;

? 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區進(jìn)行,以免交叉污染;

? 實(shí)驗完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器;

? 試劑盒里所有物品應視為污染物對待,并按照《微生物生物醫學(xué)實(shí)驗室生物安全   通則》進(jìn)行處理。

滬崢PCR優(yōu)勢:

   1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保
所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實(shí)現對細菌種屬及血清型的特異檢測。

   2.   重現性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗菌株的驗證。

   3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現對其的直接檢測,無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。

   4.   實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。

  



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